В статье проведен анализ заболеваемости ветряной оспой на современном этапе, о развитии системы профилактики этой инфекции в мире. Указано, что в России отсутствует в настоящее время отечественная вакцина против ветряной оспы. Дана информация о получении вакцинного штамма «Ока» впервые в Японии, о разработке вакцин и требований к контролю качества в Японии и Бельгии. Приведены результаты оценки качества вакцин «Окавакс» и «Варилрикс» при проведении в ГИСК им. Л.А. Тарасевича лабораторных предрегистрационных испытаний. Дан анализ клинических испытаний вышеуказанных вакцин против ветряной оспы по материалам представленным в досье на препараты.
Ветряная оспа (ветрянка) — острое и высококонтагиозное заболевание, возбудителем которого является герпесвирус 3 типа — Varicella zoster, относящийся к семейству Herpesviridae (герпесвирусов). Ветрянка (первичная ветряная оспа) считается детской малой инфекцией, ею болеют, главным образом, дети с двенадцатимесячного возраста и до 15 лет. У детей старших возрастных групп могут наблюдаться серьёзные поствакцинальные осложнения, такие как вторичная бактериальная инфекция и пневмония.
У взрослых и подростков инфекция протекает тяжело и часто сопровождается осложнениями (пневмония, энцефалит, гепатит и др.), вероятность возникновения которых увеличивается с возрастом. Улице нарушениями иммунитета (лейкозы, онкозаболевания, иммуно-дефициты различного происхождения) инфекция, вызванная вирусом варицелла зостер, протекает особенно тяжело, иногда с летальным исходом.
Во время беременности инфекция также протекает тяжело и заболевание ветрянкой в первом триместре беременности может вызывать поражения центральной нервной системы плода, дефекты развития конечностей, микроофтальмию, катаракту и другие заболевания глаз, вплоть до слепоты.
После перенесенного заболевания вирус переходит в латентную фазу. При реактивации инфекции чаще всего в возрасте от 30 до 60 лет и старше в результате различных причин (стресс, сопутствующие респираторные инфекции и т. д.) вирус, сохраняющийся, как правило, в спинальных нервных корешковых ганглиях, активируется и возникает заболевание — опоясывающий герпес, протекающий с выраженным болевым синдромом, часто приводящим к потере трудоспособности. При отсутствии лечения, рецидивы опоясывающего герпеса могут повторяться неоднократно в течение всей жизни.
Как и при ряде других вирусных инфекций, таких как корь, эпидемический паротит, краснуха, одним из ведущих средств защиты при ветряной оспе является прививка от ветрянки.
В настоящее время вакцинация детей против ветряной оспы включена в календарь прививок ряда стран Евросоюза, включая Германию, Великобританию, Италию, Испанию, Францию. Вакцина против ветряной оспы «Варилрикс» зарегистрирована в ряде стран СНГ и Балтии — в Украине, Казахстане, Азербайджане, Узбекистане, Эстонии, Латвии, Литве.
В США профилактика против ветряной оспы проводится с 1995 г. Вакцинация детей групп риска среди подростков и взрослых доказала высокую клиническую и экономическую эффективность — с 1999 г. в США отмечается резкое снижение заболеваемости и смертности от этого заболевания.
Вакцина против ветряной оспы «Окавакс» введена в календарь прививок Японии, стран Южной Америки, Канады, Австралии, Южной Кореи, Тайваня и других стран Тихого океана. По результатам проспективного наблюдения длительность поствакцинального иммунитета составляет от 6 до 11 лет, в ряде случаев — до 20 лет.
В России вакцинация против ветряной оспы не применялась до последних лет (до регистрации в РФ зарубежных вакцин против ветряной оспы), обязательная вакцинация детей против ветряной оспе не введена в Календарь прививок.
В период с 2005 г. по 2008 г. в России были зарегистрированы две вакцины против ветряной оспы — «Варилрикс», производства фирмы «ГлаксоСмит-Кляйн Байолоджикалс», Бельгия и «Окавакс», производства «Исследовательского Фонда по инфекционным заболеваниям Университета Осака (БИ-КЕН)», Япония.
Лабораторный контроль серий, экспертиза представленных нормативных документов и отчётов о клинических испытаниях этих вакцин, подготовка вакцин к регистрации в РФ были проведены в ФГУН ГИСК им. Л. А. Тарасевича Роспотребнадзора.
За рубежом осуществляется выпуск ещё двух вакцин: «Варивакс» и «Зостервакс», производства фирмы «Мерк и Ко, Инк.», США, однако эти препараты на регистрацию в РФ не представлялись.
В Бельгии разработана и испытана тетравакцина «MMRV» — комбинированная живая аттенуированная вакцина против кори, эпидемического паротита, краснухи и ветряной оспы, но этот препарат не представлялся на регистрацию в РФ. Вакцина против ветряной оспы отечественного производства в РФ до настоящего времени отсутствует.
Первые исследования по разработке вакцины против ветряной оспы были начаты в Японии и заключались в создании технологии культуральной живой вакцины на основе аттенуированного (ослабленного) вируса ветряной оспы.
Вакцинный штамм «Ока» вируса варицелла зостер был выделен в Японии в 70-е годы из везикулярной жидкости у мальчика по имени Ока, перенесшего ветряную оспу в легкой форме. Вирус изолировали и многократно пассировали в культуре клеток легкого эмбриона человека, затем в культуре клеток эмбриона морской свинки и в культуре перевиваемых человеческих диплоидных клеток WI-38, а затем в культуре человеческих диплоидных клеток MRC-5.
Полученный в результате пассажей вирус отличался от диких штаммов вируса варицелла по ряду показателей — маркёров аттенуации:
а. низкий уровень размножения в культуре клеток при температуре 390 °С;б. более выраженный иммунный ответ при иммунизации морских свинок по сравнению с иммунизацией диким вирусом;в. более высокая репродукция в культуре клеток эмбрионов морской свинки по сравнению с дикими штаммами вируса варицелла эостер;г. при рестрикционном анализе выявлены отличия в нуклеотидном составе генома вакцинного штамма «Ока» по сравнению с диким вирусом варицелла зостер;д. отсутствие нейровирулентности для чувствительных к вирусу варицелла обезьян у вакцинного штамма «Ока» (по данным клинического и гистологического обследования зараженных в мозг обезьян).
Для ведения штамма была использована система посевных серий на культуре перевиваемых клеток MRC-5: вакцинный штамм (исходный), рабочий банк вируса и посевной вирус — не более 3-4 пассажей до получения полуфабриката вакцины.
Позднее вакцинный штамм «Ока» был передан в научную лабораторию фирмы «Мерк и Ко, Инк.» США, где вирус пассировали на культуре диплоидных клеток человека — WI-38, дальнейшее пассирование вируса проводилось в культуре клеток MRC-5. Так была получена вакцина «Варивакс».
В Бельгии для производства вакцины «Варилрикс» штамм «Ока» был получен по лицензии из Университета Осака, Япония, дальнейшее ведение штамма и получение вакцины осуществлялось на клеточном субстрате MRC-5.
В 1984 г. Комитетом Экспертов по биологической стандартизации ВОЗ на основании результатов изучения вакцинного штамма «Ока», разработки технологии получения и методов контроля культуральной живой аттенуированной вакцины против ветряной оспы в различных странах были разработаны международные требования к вакцинному штамму вируса варицелла зостер «Ока» и технологии производства вакцины, определены свойства и методы контроля вакцины.
Международные требования к вакцине против ветряной оспы утвержденные в 1985 г., в последний раз были пересмотрены ВОЗ в 1993 г. (WHO Technical Report Series 848, 1994). Аттенуированный штамм «Ока» вируса варицелла зостер был признан в качестве вакцинного для производства вакцин против ветряной оспы в различных странах мира.
В соответствии с материалами представленными фирмой «ГлаксоСмит Кпяйн Байолоджикалс», Бельгия и «Исследовательским Фондом по инфекционным заболеваниям при университете Осака», Япония — вакцинный штамм «Ока» и производственная культура диплоидных клеток человека — MRC-5 были исследованы на всех уровнях пассирования. При получении производственной линии культуры клеток MRC-5 на каждом пассаже изучали стерильность, отсутствие микоплазм и других посторонних агентов (на культурах клеток животных и куриных эмбрионах), отсутствие туморогенности, пролиферативную активность, кариологию и идентичность.
Таким же образом был изучен штамм «Ока» на стерильность, отсутствие микоплазм и других посторонних агентов, биологическую активность, подлинность, специфическую безопасность (отсутствие нейровирулентности для чувствительных к вирусу варицелла зостер обезьян), острую и хроническую токсичность при заражении лабораторных животных различного возраста (мышей, морских свинок, белых крыс, кроликов).
В процессе исследований для обеих вакцин было соответствии разработан оптимальный состав препаратов в расчете на одну прививочную дозу, который приведен в табл. 1.
Таблица 1. Состав вакцин «Варилрикс» и «Окавакс», предназначенных для профилактики ветряной оспы
«Варилрикс» | «Окавакс» |
Живой аттенуированный вирус Varicella Zoster штамм Ока — ≥ 103,3 БОЕ |
Живой аттенуированный вирус Varicella Zoster штамм Ока — ≥ 103,3 БОЕ |
Альбумин сыворотки крови человека — 1 мг |
Буферная система:
|
Лактоза 32 мг | Сахароза 25 мг |
Сорбитол 6 мг | |
Маннитол 8 мг | Натрия глутамат 36 мг |
Аминокислоты 8 мг | |
Антибиотик:
|
Антибиотики:
|
Растворитель для обеих вакцин — вода для инъекций по 0,5 мл.
На основании анализа и экспертизы материалов по технологии производства вакцин, результатов доклинических испытаний представленных фирмами ь» производителями обеих вакцин, в ГИСК им. Л. А. Тарасевича были отредактированы и согласованы требования к оценке качества серий вакцин, которые вошли в российские нормативные документации. Эти требования были использованы при проведении лабораторного контроля серий, представленных фирмами — производителями вакцин «Варилрикс» и «Окавакс» в ФГУН ГИСК им. Л. А. Тарасевича Роспотребнадзора (табл. 2).
Таблица 2. Требования и показатели качества вакцин «Окавакс» и «Варилрикс»
Показатели НД | Нормы «Окавакс» | Нормы «Варилрикс» |
Описание | Аморфная масса или порошок белого цвета | Аморфная масса кремово-желтого цвета |
Подлинность | Аттенуированный штамм вируса Varicella Zoster (штамм Ока), содержащийся в вакцине, должен быть нейтрализован иммунной сывороткой к вирусу Varicella Zoster в реакции нейтрализации в культуре диплоидных клеток человека ЛЭЧ, или любой другой культуре, чувствительной к вирусу ветряной оспы; наличие нейтрализации выявляется методом непрямой иммунофлуоресценции по специфическому свечению в клетках, инфицированных вакцинным вирусом ветряной оспы — штамм ОКА. |
Аттенуированный штамм вируса Varicella Zoster (штамм Ока), содержащийся в вакцине, должен быть нейтрализован иммунной сывороткой к вирусу Varicella Zoster в реакции нейтрализации в культуре диплоидных клеток человека ЛЭЧ, или любой другой культуре, чувствительной к вирусу ветряной оспы. Индекс нейтрализации должен быть не менее 1,2 lg. |
Время растворения | Не более 2 мин. | Не более 2 мин. |
Описание восстановленного препарата | Бесцветная прозрачная или слегка беловатая жидкость | Прозрачная жидкость от желто-розового до розового цвета |
Прозрачность восстановленного препарата | Опалесценция раствора должна выдерживать сравнение с эталоном II | Опалесценция раствора должна выдерживать сравнение с эталоном I |
рН восстановленного препарата | От 6,8 до 8,0 | От 6,9 до 7,4 |
Механические включения восстановленного препарата | Видимые включения должны отсутствовать | Видимые включения должны отсутствовать |
Потеря в массе при высушивании | Не более 3,0% | Не более 3,0% |
Пирогенность | Должна быть апирогенна | Должна быть апирогенна |
Бактериальные эндотоксины | Не более 25 Еэ/мл | Не более 25 Еэ/мл |
Аномальная токсичность | Должна быть не токсична | Должна быть не токсична |
Стерильность и отсутствие микоплазм | Должна быть стерильна, не должна содержать микоплазм | Должна быть стерильна, не должна содержать микоплазм |
Количественное антибиотиков определение
|
Не более 7 мкг/0,5 мл Не более 2 мкг/0,5 мл |
Не более 25 мкг/доза |
|
||
Бычий сывороточный альбумин (БСА) | Не более 0,5 мкг/0,5 мл | Не более 0,5 мкг/доза |
Специфическая активность | Содержание вакцинного вируса Varicella Zoster; штамм Ока, в одной прививочной дозе (0,5 мл) должно быть не менее 1000 БОЕ вируса | Содержание вакцинного вируса Varicella Zoster, штамм Ока, в одной прививочной дозе (0,5 мл) должно быть не менее 1000 БОЕ вируса |
В соответствии с требованиями и описаниями методов контроля при лабораторном контроле трёх серий каждого препарата было установлено соответствие их качества регламентированным показателям. Результаты контроля серий вакцины «Окавакс» и серий вакцины «Варилрикс» свидетельствуют о соответствии серий вакцин требованиям, указанным в табл. 2.
Согласно материалам представленным фирмой-производителем вакцины «Окавакс», клинические испытания этого препарата впервые проводились с 1973 г. по 1983 г., в них участвовало 53 медицинских учреждения Японии. В соответствии с международными требованиями испытания вакцины «Окавакс» проводились в три фазы. Во время испытаний 1 фазы для изучения были использованы 2 серии вакцины.
В качестве контингентов для проведения прививок были использованы следующие группы населения:
- здоровые дети и взрослые;
- дети с сопутствующими заболеваниями;
- дети и взрослые высокого риска заражения;
При организации испытаний были использованы правила проведения испытаний действующие в международной практике:
- информированное согласие взрослых или родителей детей на проведение вакцинации;
- оценка побочных реакций: местные в течение 48 ч. после вакцинации, общие в течение 4-6 нед. после вакцинации;
- выделение вируса из везикул в случае появления последних;
- наблюдение за лицами, контактировавшими с привитыми с целью определения возможности инфицирования контактных лиц;
- иммунологическая эффективность по показателям сероконверсии — оценка уровня специфических антител в сыворотках привитых в РТГА, иммунофлуо-ресценции и в реакции нейтрализации;
- долгосрочное (от 6 мес. до 7 лет) наблюдение за привитыми — изучение длительности иммунитета, заболевания ветряной оспы среди привитых вакциной.
В результате первой фазы клинических испытаний было установлено следующее.
- У привитых 41 здоровых детей в возрасте от 2 до 5 лет специфические антитела были выявлены более, чем у 90% привитых вне зависимости от дозы вируса в вакцине (500 БОЕ, 200 БОЕ, 100 БОЕ); побочные явления у здоровых детей при вакцинации отсутствовали.
- Дети с сопутствующими заболеваниями: нефроз, нефрит, тромбопеническая пурпура, остеомиелит, гепатит, энтерит, артрит, бронхиальная астма, менингит, гемангиома — всего 28 детей, из них 23 — серо-негативные, 12 — получали стероидную терапию. Дети были привиты в связи с контактом с заболевшим ветрянкой ребенком. Уровень сероконверсии составил 100%, побочные явления: у 6 из 28 — температура выше 370 С, везикулярная сыпь у 2 детей в течение 1-1,5 дня после вакцинации.
- Вакцинировано 4 ребёнка в возрасте от 2 до 5 лет с диагнозом острый лейкоз в стадии полной ремиссии, отсутствием химиотерапии в течение 2 нед. до и 2 нед. после вакцинации. Доза вакцины — 500 БОЕ. У всех детей наблюдали четырехкратное и более нарастание титров антител, лихорадка и специфические высыпания отсутствовали.
- При вакцинации 30 здоровых детей разными дозами вакцинного вируса (от 200 БОЕ до 2000 БОЕ) наблюдали выработку антител и отсутствие побочных явлений. При вакцинации 20 детей с острым лейкозом (от 1 г. до 9 лет) сероконверсия наблюдалась 17 из 20 человек, побочные явления проявлялись повышением температуры и сыпи в легкой форме у 50% привитых.
Во 2 фазе клинических испытаний вакцины «Окавакс» были использованы две серии вакцины, полученные после 6 дополнительных пассажей в культуре диплоидных клеток WI-38. Прививали детей с диагнозами лейкемия или другие злокачественные новообразования. Условия проведения испытаний — те же, что и при фазе 1, но под наблюдением находились не только привитые дети, но и другие члены семьи.
- Острый лейкоз. Привито 102 ребёнка. Серокон-версия от 88,9% до 93,3%, частота побочных реакций — 18,1%.
- Солидные злокачественные опухоли. Привито 13 детей, уровень сероконверсии — 92,3%, побочная реакция — у 1 ребенка.
- Сопутствующие заболевания (без лихорадочного компонента) привито 104 ребенка. Сероконверсия составила 100%.
При проведении фазы 3 клинических испытаний прививки проводили при использовании 18 серий вакцины, полученных в производственных условиях на культуре диплоидных клеток человека MRC-5. Цель 3 фазы испытаний — изучение вакцины в условиях практического применения для пациентов высокого риска заражения (лейкозы, злокачественные опухоли), нефрозы, коллагенозы, бронхиальная астма, а таю^е при вакцинации взрослых — студентов, медиков, женщин (для предотвращения возникновения инфекции во время беременности).
В результате проведения фазы 3 испытаний вакцины «Окавакс» были привито 1252 здоровых детей. Сероконверсия наблюдалась у 1206 детей (96%), побочные реакции (в легкой форме) — у 15 детей (1%), у 13 детей (1%) при наблюдении в течение одного года после вакцинации была диагностирована ветряная оспа в легкой форме.
Привито 2179 пациентов с диагнозом острый лейкоз (при прекращении химиотерапии). Сероконверсия определена у 166 человек (93%). Побочные реакции сыпь, лихорадка в легкой форме у 31 человека (17%), у 32 пациентов (18%) после вакцинации были выявлены клинические проявления ветрянки (23 — легкая, 7 — средней тяжести, 2 — тяжелая формы). Последние два ребенка с тяжёлой формой ветрянки были инфицированы во время проведения курса интенсивной химиотерапии.
Привито 333 пациента с различными сопутствующими заболеваниями. Сероконверсия у 306 пациентов (92%), побочные реакции у 15 человек (5%), ветрянка диагностирована у 9 привитых (3%). Отдаленные наблюдения за привитыми осуществлялись в течение 7 лет.
Всего под наблюдением было 810 пациентов (неврологические заболевания — 276, болезни сердца — 146, злокачественные новообразования — 87, иммунологические и аллергические заболевания — 155, врожденные аномалии и пороки развития — 78, заболевания желудочно-кишечного тракта и эндокринной системы — 68), из них только у 21 пациента после вакцинации наблюдали проявление симптомов ветряной оспы, и в 4 случаях отмечено развитие герпес зостер.
В настоящее время вакцина «Окавакс» применяется в 32 странах мира. За период с 2004 г. по 2007 г. предприятием «БИКЕН» выпущено и реализовано в Японии и других странах мира более 4,5 млн. доз вакцины «Окавакс», за этот период было зафиксировано всего 38 случаев развития побочных реакций различной степени тяжести с преобладанием реакций в легкой форме.
Вакцина «Окавакс» предназначена:
- для профилактики ветряной оспы с 12 месяцев, в первую очередь у лиц, отнесённым к группам высокого риска, не болевших ветряной оспой и не привитых ранее.
- для экстренной профилактики ветряной оспы у лиц, не болевших ветряной оспой и не привитых ранее, находившихся в тесном контакте с больными ветряной оспой (члены семей, врачи, средний и младший медицинский персонал, а также другие лица). Схемы вакцинации:
- дети от 12 мес до 13 лет — 1 доза (0,5 мл) вакцины однократно, подкожно.
- лица старше 13 лет (включая контактных с группами высокого риска и заболевшими) — 1 доза (0,5 мл) двукратно с интервалом между введениями 6-10 нед., подкожно.
Экстренная профилактика — 1 доза (0,5 мл), однократно, подкожно в течение первых 96 ч. после контакта (предпочтительно — в течение первых 72 ч.). Вакцина «Варилрикс» была исследована в рамках международного испытания: «Слепое, рандомизированное, контролируемое, многоцентровое исследование живой ослабленной вакцины против ветряной оспы производства фирмы «ГлаксоСмитКляйн Байолоджикалс», Бельгия, назначаемой по однократной схеме и комбинированной вакцины против кори, эпидемического паротита, краснухи, ветряной оспы, производства фирмы «ГлаксоСмитКляйн Байолоджикалс», Бельгия, назначаемой по двукратной схеме здоровым детям в течение второго года жизни». Испытания проводились для оценки клинической эффективности в отношении заболевания ветряной оспой.
Клинические испытания вакцины «Варилрикс» в рамках вышеуказанного испытания были проведены в период 2005-2006 гг. Оценивалась иммунологическая эффективность (% сероконверсий и СГТ (среднегеометрический титр) антител к вирусу ветряной оспы) и безопасность применения вакцины через 42 дня, 84 дня, 1 год, 2 года после однократной вакцинации детей второго года жизни.
В данном международном исследовании были проведены прививки детей вакциной «Варилрикс» также и на территории России. Всего было привито более 5 000 детей, из них на территории России — было привито 397 детей в возрасте от 12 до 22 мес., не имеющих противопоказаний к проведению вакцинации, не болевших ветряной оспой, родители которых подписали информированное согласие на участие в этом исследовании. В течение двухлетнего наблюдения за привитыми детьми в России не было выявлено ни одного случая ветряной оспы.
В целом, при однократной вакцинации, через 42 дня после прививки наблюдали сероконверсию у 97% привитых, у 55% детей СГТ антител был более 1:128, при этом выявлены низкие показатели реактогенности — 20% умеренных местных реакций, 3,8% умеренных температурных реакций при полном отсутствии серьёзных нежелательных явлений.
На основании аттестации серий вакцин против ветряной оспы, «Окавакс» и «Варилрикс», на соответствие требованиям нормативной документации, анализа результатов доклинического изучения и проведенных международных клинических испытаний, организованных фирмой «ГлаксоСмитКляйн Байолоджикалс», многолетнего применения вакцин в различных странах мира — вакцины против ветряной оспы «Варилрикс» и «Окавакс» — зарегистрированы в РФ и рекомендованы для практического применения для вакцинации детей с двенадцатимесячного возраста и взрослых.
Современная ситуация с заболеванием ветряной оспой в России — более 1000 случаев ветрянки на 100 тыс. населения, увеличение заболеваемости детей в последние годы почти в 2 раза, тяжёлый ущерб наносимый здоровью взрослых людей, особенно пожилого возраста.
Среди воздушно-капельных инфекций (без учета гриппа и ОРВИ) ветряная оспа составляет 50-70%. Ежегодно в РФ регистрируется 500-800 тыс. случаев этого заболевания, при этом у 10 тыс. детей развиваются тяжёлые осложнения, около 50 человек ежегодно погибают. Болеют, в основном, дети в возрасте 3-6 лет, индекс контагиозности достигает 100%.
Сложившаяся ситуация настоятельно требует проведения организационных мероприятий по профилактике ветряной оспы в России. Необходимо с учётом накопленного международного опыта рассмотреть вопрос о возможности организации отечественного производства вакцины против ветряной оспы для обеспечения населения РФ необходимым количеством доз вакцины.
Литература:
- Воробьёва М. С. Ладыженская И. П., Бархалёва О. А. — «Современное состояние вакцинопрофилактики ветряной оспы (Varicella zoster)»Тезисы Всероссийской научно-практической конференции «Вакцинология 2008. Совершенствование иммунобиологических средств профилактики, диагностики и лечения инфекционных болезней», Москва, 2008 г., стр. 32.
- В.К. Таточенко — Вакцинация против ветряной оспы. Отвечаем на вопросы педиатров (репринт) — Ж. Вопросы современной педиатрии, 2009г., №3 (том 8).
- «Лечение и профилактика ветряной оспы у детей в современных условиях» Методические рекомендации, подготовлены Тимченко В.Н. с соавторами, Санкт-Петербург, 2008 г., 32 стр.Инфекционная заболеваемость в РФ в 2005-2006 г. (Информационный сборник) / ФЦГСЭН МЗ РФ, М. 2007 г., С. —5, 13, 20.
- Инструкция по применению вакцины «Варилрикс».
- Инструкция по применению вакцины «Окавакс».